Persiapan Larutan Buffer: Panduan Komprehensif Buffer Fosfat, Asetat, dan Jenis Buffer Lainnya untuk Industri Farmasi

Daftar Isi

1. Pengantar: Peran Penting Buffer dalam Farmasi
2. Definisi dan Konsep Dasar Larutan Buffer
3. Panduan Laboratorium Ahli dan Pemecahan Masalah Persiapan Buffer
4. Ketergantungan pH terhadap Suhu
5. Urutan Penambahan yang Tepat untuk Mencegah Presipitasi
6. Pemecahan Masalah Umum pada Larutan Buffer
7. Kepatuhan Regulasi dan Pengingat Dokumentasi
8. Larutan Buffer Standar
9. Persiapan Larutan Buffer Standar
10. Larutan Reagen untuk Buffer Standar
11. Komposisi Larutan Buffer Standar
12. Larutan Buffer Lainnya yang Umum Digunakan
13. Referensi Regulasi

1. Pengantar: Peran Penting Buffer dalam Farmasi

Larutan buffer memainkan peranan yang sangat vital dalam menjamin stabilitas produk serta menyediakan lingkungan yang sesuai untuk berbagai reaksi kimia dan biokimia. Dalam industri farmasi, buffer digunakan secara luas dalam metode analitis, pengembangan formulasi, dan studi stabilitas produk. Oleh karena itu, pemahaman yang mendalam mengenai cara menyiapkan larutan buffer dengan benar menjadi kunci utama untuk memperoleh hasil yang akurat dan dapat diandalkan baik di laboratorium maupun dalam kegiatan produksi obat.

Artikel ini akan menjelaskan secara komprehensif mengenai prinsip kerja, metode persiapan, berbagai jenis larutan buffer, serta aspek-aspek kualitas yang berkaitan dengan penggunaan buffer dalam industri farmasi. Pemahaman yang tepat mengenai hal-hal ini sangat penting bagi setiap profesional farmasi yang terlibat dalam pengujian, formulasi, maupun produksi produk obat.

2. Definisi dan Konsep Dasar Larutan Buffer

Larutan buffer didefinisikan sebagai suatu sistem larutan yang memiliki kemampuan untuk menahan perubahan pH ketika sejumlah kecil asam atau basa ditambahkan ke dalamnya. Sistem buffer bekerja dengan mempertahankan konsentrasi hidrogen yang stabil, yang merupakan faktor kritis bagi kelancaran reaksi kimia maupun stabilitas produk farmasi.

Dalam konteks industri farmasi, larutan buffer memiliki beragam aplikasi, antara lain:

• Penggunaan dalam formulasi sediaan obat, baik sediaan padat, cair, maupun semisolid
• Persiapan preparat biologis yang memerlukan kondisi pH spesifik
• Metode analitis seperti kromatografi cair kinerja tinggi (HPLC), pengujian pelarutan, dan analisis laboratorium basah
• Media kultur untuk pertumbuhan mikroba dalam pengujian mikrobiologi produk farmasi
• Studi stabilitas yang memerlukan pemeliharaan kondisi pH tertentu selama periode waktu tertentu

3. Panduan Laboratorium Ahli dan Pemecahan Masalah Persiapan Buffer

Selama proses persiapan buffer di laboratorium farmasi yang beroperasi sesuai standar cGMP, diperlukan ketelitian dalam pelaksanaan dan kepatuhan terhadap Prosedur Operasional Standar (SOP). Larutan buffer digunakan secara luas dalam analisis dan memiliki dampak besar terhadap akurasi instrumen HPLC, pengujian pelarutan (dissolution testing), serta analisis laboratorium basah (wet lab analysis). Oleh karena itu, pengenalan terhadap variabel fisik dan kimia yang harus diperhatikan selama persiapan larutan buffer merupakan hal yang sangat penting.

Berikut ini adalah beberapa wawasan teknis mengenai parameter teknis kritis serta teknik pemecahan masalah berdasarkan pengalaman industri yang dapat membantu mencapai kepatuhan regulasi dan mencegah kesalahan laboratorium dalam lingkungan kerja cGMP.

4. Ketergantungan pH terhadap Suhu

Salah satu penyebab utama hasil pengujian di luar spesifikasi (Out of Specification/OOS) adalah akibat kalibrasi pH meter pada satu suhu, kemudian menyiapkan buffer pada suhu yang berbeda. Larutan buffer bersifat tergantung pada suhu, khususnya nilai pH buffer akan berubah seiring dengan perubahan suhu karena dipengaruhi oleh konstanta disosiasi.

Buffer Tris:

Sangat sensitif terhadap suhu. Jika suatu larutan Tris buffer disiapkan pada pH 7,5 pada suhu 25 °C, maka pH-nya akan turun menjadi 7,2 pada suhu 37 °C untuk buffer yang sama. Perbedaan ini cukup signifikan dan dapat mempengaruhi hasil analisis secara substansial jika tidak diperhatikan dengan seksama.

Buffer Fosfat:

Memiliki sensitivitas suhu yang moderat, namun sangat kritis terhadap perubahan suhu dalam konteks fasa mobile pada kromatografi. Perubahan suhu yang kecil sekalipun dapat mempengaruhi retensi dan resolusi komponen analit secara signifikan.

Tindakan yang Harus Dilakukan:

Pastikan selalu bahwa pH akhir diukur dan disesuaikan pada suhu yang sama dengan yang tertulis dalam monograf spesifik atau metode analitis tervalidasi (umumnya 20 °C atau 25 °C). Penggunaan probe pH dengan kompensasi suhu sangat disarankan untuk memperoleh hasil yang lebih akurat dan konsisten.

5. Urutan Penambahan yang Tepat untuk Mencegah Presipitasi

Urutan penambahan komponen saat menyiapkan buffer multikomponen sangatlah penting, terutama ketika buffer mengandung pelarut organik yang mudah menguap atau ketika sistem buffer mengandung garam dalam konsentrasi tinggi, seperti garam fosfat dan asetat.

Kesalahan Umum:

Penambahan HCl atau NaOH sebagai asam atau basa penyesuai pH ke dalam larutan garam pekat dapat menciptakan kondisi supersaturasi yang mengakibatkan presipitasi (pengendapan) komponen buffer. Presipitasi ini dapat mengganggu akurasi analisis dan mengharuskan ulang persiapan buffer dari awal.

Langkah yang Benar:

Larutkan garam buffer utama dalam sekitar 80% dari volume akhir pelarutan dengan air deionisasi atau air murni (kelas Milli-Q) sebelum penambahan penyesuai pH (HCl atau NaOH) atau pelarut organik (Asetonitril atau Metanol). Pastikan semua zat terlarut telah larut sempurna sebelum menambahkan penyesuai pH atau pelarut organik. Hal ini sangat penting untuk mencegah terbentuknya endapan yang dapat mengganggu kualitas buffer.

6. Pemecahan Masalah Umum pada Larutan Buffer

Jika Anda telah menyiapkan suatu larutan buffer dan mendapati bahwa pH-nya belum mencapai target setelah upaya penyesuaian, berikut ini adalah tabel pemecahan masalah yang dapat membantu melakukan koreksi sekaligus mempertahankan validitas hasil analisis:

7. Kepatuhan Regulasi dan Pengingat Dokumentasi

Telusur Kembali (Traceability):

Catat informasi telusur kembali untuk semua bahan baku termasuk nama produsen, nomor lot, dan tanggal kedaluwarsa. Dokumentasi yang lengkap dan akurat merupakan fondasi dari sistem jaminan mutu dan kepatuhan regulasi dalam industri farmasi.

Pemilihan Peralatan Kaca:

Gunakan peralatan kaca volumetrik kelas A untuk penyesuaian volume akhir. Hindari penyimpanan buffer alkali dalam wadah kaca borosilikat dalam jangka waktu yang lama karena silika dapat terlarut keluar dari kaca dan mengkontaminasi larutan buffer, yang dapat mempengaruhi stabilitas dan kualitas buffer.

Masa Simpan Buffer:

Larutan buffer berbasis air (terutama buffer fosfat dan asetat) harus digunakan dalam waktu 24 hingga 48 jam setelah persiapan, kecuali didukung oleh studi stabilitas yang menunjukkan masa simpan yang lebih lama. Hal ini penting untuk mencegah pertumbuhan mikroba yang akan menurunkan kapasitas buffer dan mengganggu baseline kromatografi.

8. Larutan Buffer Standar

Larutan buffer standar merupakan larutan dengan nilai pH standar yang digunakan sebagai referensi dalam pengukuran pH serta untuk melaksanakan berbagai pengujian farmakope yang memerlukan penyesuaian atau pemeliharaan pH tertentu. Larutan buffer standar dapat disiapkan dengan metode-metode yang dijelaskan di bawah ini.

Persiapan larutan buffer khusus dijelaskan pada bagian-bagian di mana penggunaannya ditentukan, seperti dalam uji bioassay antibiotik atau dalam monograf individu yang mengindikasikan penggunaan larutan tersebut.

Reagen yang diperlukan untuk persiapan larutan buffer standar diuraikan di sini. Semua reagen kristal kecuali asam borat harus dikeringkan pada suhu 110° hingga 120°C selama 1 jam sebelum digunakan. Air bebas karbon dioksida harus digunakan untuk menyiapkan larutan buffer, dan di mana pun air disebutkan untuk persiapan larutan tersebut, penggunaan air bebas karbon dioksida tersirat.

Larutan yang telah disiapkan harus disimpan dalam botol kaca bertutup kaca yang tahan secara kimiawi dan bebas alkali, serta digunakan dalam waktu 3 bulan setelah persiapan. Setiap larutan yang telah menjadi keruh atau menunjukkan tanda-tanda deteriorasi lainnya harus segera dibuang dan tidak digunakan.

9. Persiapan Larutan Buffer Standar

Larutan buffer standar untuk berbagai rentang nilai pH dari 1,2 hingga 10,0 dapat disiapkan dengan kombinasi yang tepat dari asam klorida 0,2 M atau natrium hidroksida 0,2 M dan larutan-larutan yang diuraikan di bawah ini, dengan proporsi yang ditunjukkan pada tabel-tabel yang menyertainya. Nilai pH standar yang tercantum dalam tabel dan di tempat lain dalam lampiran dianggap dapat direproduksi dalam rentang ± 0,02 unit pada suhu 25°.

10. Larutan Reagen untuk Buffer Standar

1. Asam Borat dan Kalium Klorida, 0,2 M:

Larutkan 12,366 gram asam borat dan 14,911 gram kalium klorida dalam air dan encerkan dengan air hingga mencapai volume 1000 ml.

2. Natrium Hidrogen Fosfat, 0,2 M:

Larutkan 71,630 gram natrium hidrogen fosfat dalam air dan encerkan dengan air hingga volume 1000 ml.

3. Asam Klorida, 0,2 M:

Asam klorida diencerkan dengan air sehingga mengandung 7,292 gram HCl dalam 1000 ml.

4. Kalium Klorida, 0,2 M:

Larutkan 14,911 gram kalium klorida dalam air dan encerkan dengan air hingga volume 1000 ml.

5. Kalium Dihidrogen Fosfat, 0,2 M:

Larutkan 27,218 gram kalium dihidrogen fosfat dalam air dan encerkan dengan air hingga volume 1000 ml.

6. Kalium Hidrogen Ftalat, 0,2 M:

Larutkan 40,846 gram kalium hidrogen ftalat dalam air dan encerkan dengan air hingga volume 1000 ml.

7. Natrium Hidroksida, 0,2 M:

Larutkan natrium hidroksida dalam air untuk menghasilkan larutan 40 hingga 60 persen b/v dan biarkan berdiri. Dengan tindakan pencegahan untuk menghindari absorpsi karbon dioksida, ambil cairan supernatan yang jernih dan encerkan dengan air bebas karbon dioksida, volume cairan yang sesuai untuk mengandung 8,0 gram NaOH dalam 1000 ml.

CATATAN: Natrium hidroksida 0,2 M tidak boleh digunakan lebih dari satu bulan setelah persiapan.

11. Komposisi Larutan Buffer Standar

Buffer Asam Klorida: Letakkan 50 ml kalium klorida 0,2 M dalam labu volumetrik 200 ml, tambahkan volume asam klorida 0,2 M yang ditentukan (lihat Tabel 1), kemudian tambahkan air hingga mencapai volume.

Buffer Ftalat Asam: Letakkan 50,0 ml kalium hidrogen ftalat 0,2 M dalam labu volumetrik 200 ml, tambahkan volume asam klorida 0,2 M yang ditentukan (lihat Tabel 2), kemudian tambahkan air hingga volume.

Buffer Ftalat Ternetralkan: Letakkan 50,0 ml kalium hidrogen ftalat 0,2 M dalam labu volumetrik 200 ml, tambahkan volume natrium hidroksida 0,2 M yang ditentukan (lihat Tabel 3), kemudian tambahkan air hingga volume.

Persiapan Buffer Fosfat: Letakkan 50,0 ml kalium dihidrogen fosfat 0,2 M dalam labu volumetrik 200 ml, tambahkan volume natrium hidroksida 0,2 M yang ditentukan (lihat Tabel 4), kemudian tambahkan air hingga volume.

Buffer Borat Basa: Letakkan 50,0 ml asam borat dan kalium klorida 0,2 M dalam labu volumetrik 200 ml, tambahkan volume natrium hidroksida 0,2 M yang ditentukan (lihat Tabel 5), kemudian tambahkan air hingga volume.

12. Larutan Buffer Lainnya yang Umum Digunakan

Buffer Asetat pH 2,8:

Larutkan 4 gram natrium asetat anhidrat dalam sekitar 840 ml air, tambahkan asam asetat glasial yang cukup untuk menyesuaikan pH menjadi 2,8 (sekitar 155 ml) dan encerkan dengan air hingga 1000 ml.

Buffer Asetat pH 3,4:

Campurkan 50 ml natrium asetat 0,1 M dengan 950 ml asam asetat 0,1 M.

Buffer Asetat pH 3,5:

Larutkan 25 gram asam asetat amonium dalam 25 ml air dan tambahkan 38 ml asam klorida 7 M. Sesuaikan pH menjadi 3,5 dengan asam klorida 2 M atau amonia 6 M dan encerkan dengan air hingga 100 ml.

Buffer Asetat pH 3,7:

Larutkan 10 gram natrium asetat anhidrat dalam 300 ml air, sesuaikan pH menjadi 3,7 dengan asam asetat glasial dan encerkan dengan air hingga 1000 ml. Sebelum digunakan sesuaikan ke pH 3,7 jika diperlukan dengan asam asetat glasial atau natrium asetat anhidrat sesuai kebutuhan.

Buffer Asetat pH 4,0:

Letakkan 2,86 ml asam asetat glasial dan 1,0 ml larutan natrium hidroksida 50 persen b/v dalam labu volumetrik 1000 ml, tambahkan air hingga volume dan aduk. Sesuaikan pH jika diperlukan.

Buffer Asetat pH 4,4:

Larutkan 136 gram natrium asetat dan 77 gram asam asetat amonium dalam air dan encerkan dengan air hingga 1000 ml. Tambahkan 250 ml asam asetat glasial dan aduk.

Buffer Asetat pH 4,6:

Larutkan 5,4 gram natrium asetat dalam 50 ml air, tambahkan 2,4 ml asam asetat glasial dan encerkan dengan air hingga 100 ml. Sesuaikan pH jika diperlukan.

Buffer Asetat pH 4,7:

Larutkan 8,4 gram natrium asetat dan 3,35 ml asam asetat glasial dalam air yang cukup untuk menghasilkan 1000 ml. Sesuaikan pH jika diperlukan.

Buffer Asetat pH 5,0:

Larutkan 13,6 gram natrium asetat dan 6 ml asam asetat glasial dalam air yang cukup untuk menghasilkan 1000 ml. Sesuaikan pH jika diperlukan.

Buffer Asetat pH 5,5:

Larutkan 272 gram natrium asetat dalam 500 ml air dengan pemanasan hingga 35°, dinginkan dan tambahkan perlahan 50 ml asam asetat glasial dan air yang cukup untuk menghasilkan 1000 ml. Sesuaikan pH jika diperlukan.

Buffer Asetat pH 6,0:

Larutkan 100 gram asam asetat amonium dalam 300 ml air, tambahkan 4,1 ml asam asetat glasial, sesuaikan pH jika diperlukan menggunakan amonia 10M atau asam asetat 5 M dan encerkan dengan air hingga 500 ml.

Larutan Buffer Asetat:

Larutkan 14 gram kalium asetat dan 20,5 ml asam asetat glasial dalam air yang cukup untuk menghasilkan 1000 ml.

Buffer Asetat-Edetat pH 5,5:

Larutkan 250 gram asam asetat amonium dan 15 gram disodium edetat dalam 400 ml air dan tambahkan 125 ml asam asetat glasial dalam air yang cukup untuk menghasilkan 1000 ml.

Buffer Asam Asetat-Ammonium Asetat:

Larutkan 77,1 gram asam asetat amonium dalam air, tambahkan 57 ml asam asetat glasial dan encerkan dengan air hingga 1000 ml.

Buffer Amonia-Amonium Klorida:

Larutkan 67,5 gram amonium klorida dalam sekitar 200 ml air, tambahkan 570 ml larutan amonia pekat dan encerkan dengan air hingga 1000 ml.

Buffer Amonia pH 9,5:

Larutkan 33,5 gram amonium klorida dalam 150 ml air dan 42 ml amonia 10M dan encerkan dengan air hingga 250 ml. Simpan dalam wadah polietilena.

Buffer Amonia pH 10,0:

Larutkan 5,4 gram amonium klorida dalam 20 ml air, tambahkan 35 ml amonia 10 M dan encerkan dengan air hingga 100 ml.

Buffer Amonia pH 10,9:

Larutkan 67,5 gram amonium klorida dalam amonia 10 M yang cukup untuk menghasilkan 1000 ml.

Buffer Karbonat pH 9,7:

Larutkan 8,4 gram natrium bikarbonat dan 10,6 gram natrium karbonat dalam air yang cukup untuk menghasilkan 500 ml.

Buffer Klorida pH 2,0:

Larutkan 6,57 gram kalium klorida dalam air, tambahkan 119,0 ml asam klorida 0,1 M dan encerkan dengan air hingga 1000 ml.

Buffer Sitrat:

Larutkan 0,5 gram asam sitrat monohidrat dan 0,4 gram natrium fosfat dibasik dalam air yang cukup untuk menghasilkan 1000 ml.

Buffer Sitro-fosfat pH 5,0:

Campurkan 48,5 ml asam sitrat 0,1 M dengan disodium hidrogen fosfat 0,2 M yang cukup untuk menghasilkan 100 ml.

Buffer Sitro-fosfat pH 6,0:

Campurkan 36,8 ml larutan asam sitrat 2,1 persen b/v dengan 63,2 ml larutan disodium hidrogen fosfat 7,15 persen b/v.

Buffer Sitro-fosfat pH 7,0:

Campurkan 17,6 ml larutan asam sitrat 2,1 persen b/v dengan 82,4 ml larutan disodium hidrogen fosfat 7,15 persen b/v.

Buffer Sitro-fosfat pH 7,2:

Campurkan 13,0 ml larutan asam sitrat 2,1 persen b/v dengan 87,0 ml larutan disodium hidrogen fosfat 7,15 persen b/v.

Buffer Sitro-fosfat pH 7,6:

Larutkan 1,33 gram asam sitrat dan 67,1 gram disodium hidrogen fosfat dalam air yang cukup untuk menghasilkan 1000 ml.

Buffer Fosfat pH 2,0:

Larutkan 0,136 gram kalium dihidrogen fosfat dalam 800 ml air, sesuaikan pH menjadi 2,0 dengan asam klorida dan tambahkan air yang cukup untuk menghasilkan 1000 ml.

Buffer Fosfat pH 2,5:

Larutkan 100 gram kalium dihidrogen fosfat dalam 800 ml air, sesuaikan pH menjadi 2,5 dengan asam klorida dan tambahkan air yang cukup untuk menghasilkan 1000 ml.

Buffer Fosfat pH 3,0:

Larutkan 1,36 gram kalium dihidrogen ortofosfat dan 2 ml trietilamin dalam 800 ml air, sesuaikan pH menjadi 3,0 dengan asam ortofosfat dan tambahkan air yang cukup untuk menghasilkan 1000 ml.

Buffer Fosfat pH 3,6:

Larutkan 0,900 gram disodium hidrogen fosfat anhidrat dan 1,298 gram asam sitrat monohidrat dalam air yang cukup untuk menghasilkan 1000 ml.

Buffer Fosfat pH 4,0 (Campuran):

Larutkan 5,04 gram disodium hidrogen fosfat dan 3,01 gram kalium dihidrogen fosfat dalam air yang cukup untuk menghasilkan 1000 ml. Sesuaikan pH dengan asam asetat glasial.

Buffer Fosfat pH 4,9:

Larutkan 40 gram natrium dihidrogen fosfat dan 1,2 gram natrium hidroksida dalam air yang cukup untuk menghasilkan 100 ml. Jika diperlukan, sesuaikan pH dengan asam sulfat 1 M atau natrium hidroksida 1 M sesuai kebutuhan.

Buffer Fosfat pH 5,0:

Larutkan 6,8 gram kalium dihidrogen fosfat dalam 1000 ml air dan sesuaikan pH menjadi 5,0 dengan kalium hidroksida 10 M.

Buffer Fosfat pH 5,5 (Campuran):

Larutan I: Larutkan 13,61 gram kalium dihidrogen fosfat dalam air yang cukup untuk menghasilkan 1000 ml.

Larutan II: Larutkan 35,81 gram disodium hidrogen fosfat dalam air yang cukup untuk menghasilkan 1000 ml.

Campurkan 96,4 ml Larutan I dengan 3,6 ml Larutan II.

Buffer Fosfat pH 6,5:

Larutkan 60,5 gram disodium hidrogen fosfat dan 46 gram kalium dihidrogen fosfat dalam air, tambahkan 100 ml disodium edetat 0,02 M dan 20 mg merkuri klorida dan encerkan dengan air untuk menghasilkan 1000 ml.

Buffer Fosfat pH 6,8 (Campuran):

Larutkan 28,20 gram disodium hidrogen fosfat dan 11,45 gram kalium dihidrogen fosfat dalam air yang cukup untuk menghasilkan 1000 ml.

Buffer Fosfat pH 7,0 (Campuran):

Larutkan 0,50 gram disodium hidrogen fosfat anhidrat dan 0,301 gram kalium dihidrogen fosfat dalam air yang cukup untuk menghasilkan volume yang sesuai.

Buffer Fosfat pH 7,0 dengan Azida (Campuran):

Ke dalam 1000 ml larutan yang mengandung 1,8 persen b/v disodium hidrogen fosfat dan 2,3 persen b/v natrium klorida, tambahkan larutan yang mengandung 0,78 persen b/v natrium dihidrogen fosfat dan 2,3 persen b/v natrium klorida (sekitar 280 ml) untuk menghasilkan pH 7,0. Larutkan natrium azida yang cukup dalam larutan yang dihasilkan untuk menghasilkan larutan 0,02 persen b/v.

Buffer Fosfat pH 7,5:

Larutkan 6,8 gram kalium dihidrogen ortofosfat dan 1,56 gram natrium hidroksida dalam 900 ml air, sesuaikan pH 7,5 dengan larutan natrium hidroksida dan encerkan dengan air untuk menghasilkan 1000 ml.

Buffer Fosfat pH 8,0 (0,02 M):

Campurkan 50 ml kalium dihidrogen fosfat 0,2 M dengan 46,8 ml natrium hidroksida 0,2 M dan tambahkan air yang cukup untuk menghasilkan 500 ml.

Buffer Fosfat Standar (0,025 M):

Larutkan 3,40 gram kalium dihidrogen fosfat dan 3,55 gram disodium hidrogen fosfat anhidrat, keduanya sebelumnya dikeringkan pada 110° hingga 130° selama 2 jam, dalam air yang cukup untuk menghasilkan 1000 ml.

Buffer Fosfat 0,05 M:

Larutkan 6,8 gram kalium dihidrogen ortofosfat dalam air yang cukup untuk menghasilkan 1000 ml.

Saline Fosfat-Buffer pH 6,4:

Larutkan 1,79 gram disodium hidrogen fosfat, 1,36 gram kalium dihidrogen fosfat dan 7,02 gram natrium klorida dalam air yang cukup untuk menghasilkan 1000 ml.

Saline Fosfat-Buffer pH 7,4:

Larutkan 2,38 gram disodium hidrogen fosfat, 0,19 gram kalium dihidrogen fosfat dan 8,0 gram natrium klorida dalam air yang cukup untuk menghasilkan 1000 ml. Sesuaikan pH jika diperlukan.

Buffer Tris-Asetat pH 8,5:

Larutkan 0,294 gram kalsium klorida dan 12,11 gram tris (hidroksimetil) aminometan dalam air. Sesuaikan pH dengan asam asetat 5 M dan encerkan hingga 1000,0 ml dengan air.

Buffer Tris-Klorida pH 7,4:

Larutkan 7,27 gram tris (hidroksimetil) metilamin dan 5,27 gram natrium klorida, sesuaikan pH jika diperlukan dan encerkan dengan air untuk menghasilkan 1000 ml.

Buffer Tris (hidroksimetil) Aminometan pH 7,4:

Larutkan 30,3 gram tris (hidroksimetil) aminometan dalam sekitar 200 ml air. Tambahkan 183 ml asam klorida 1 M. Encerkan hingga 500,0 ml dengan air.

CATATAN: pH adalah 7,7-7,8 pada suhu kamar dan 7,4 pada 37°. Larutan ini stabil selama beberapa bulan pada suhu 4°C.

Buffer Tris (hidroksimetil) Aminometan pH 8,1:

Larutkan 2,9 gram kalsium klorida dengan 400 ml larutan tris (hidroksimetil) aminometan, sesuaikan pH dengan asam klorida 0,1 M dan encerkan dengan air untuk menghasilkan 1000 ml.

13. Referensi Regulasi

• 21 CFR Bagian 211.194 — Catatan Laboratorium
• USP Technical Repository :: Bab Umum <791> pH
• Panduan FDA :: ICH Q7 CPOB untuk Bahan Aktif Farmasi