HPLC
Kromatografi cair kinerja tinggi atau HPLC adalah metode yang digunakan untuk memisahkan, mengidentifikasi, dan kuantitas setiap analit dalam campuran kompleks menggunakan fase gerak. C8 dan C18 mengacu pada permukaan terikat rantai alkil dan keduanya digunakan dalam pemisahan HPLC.
Ada banyak jenis fase balik yang ada di pasaran, termasuk kolom C8 dan C18. C18 adalah yang paling populer daripada kolom C8. C8 dan C18 keduanya merupakan kolom fase terbalik, kedua kolom mengacu pada panjang rantai alkil dari fase terikat.
Panjang rantai mempengaruhi hidrofobisitas fase sorben dan oleh karena itu meningkatkan waktu retensi komponen.
C18 memiliki jumlah hidrofobisitas maksimum, karena semakin panjang rantai karbon, C-18 lebih hidrofobik dibandingkan fase sebaliknya.
Apa itu Kolom C8?
Kolom C8 adalah jenis kolom yang digunakan dalam kromatografi fase terbalik. Umumnya, kromatografi fase terbalik menggunakan fase diam hidrofobik. Namun, padatan mendukung fase diam atau kolom mengandung silika termodifikasi. Di sini, silika adalah fase diam hidrofilik.
Kolom C8 adalah salah satu bentuk kolom yang terdapat pada beberapa peralatan HPLC, dan memiliki Oktilsilana sebagai fase diamnya. Dan, senyawa dalam fase diam ini memiliki 8 atom karbon dalam rantai alkilnya. Lebih lanjut, kolom ini cenderung menahan komponen analit lebih sedikit dibandingkan kolom C18. Oleh karena itu, suatu senyawa akan terelusi lebih cepat dalam kolom C8. • Namun, kepadatannya lebih kecil karena jumlah atom karbonnya lebih sedikit; panjang rantai karbon senyawa ini dalam fasa diamnya pendek. Selain itu, senyawa nonpolar bergerak ke bawah kolom dengan cepat bersama kolom C8. Hal ini terutama disebabkan oleh rendahnya hidrofobisitas senyawa C8.
Apa itu Kolom C18?
Kolom C18 juga merupakan bentuk kolom yang kami gunakan pada peralatan HPLC, dan memiliki fase diam Octadecylsilane. Octadecylsilane (dalam fase diam) memiliki 18 atom karbon dalam rantai alkilnya. Lebih lanjut, kolom ini cenderung mempertahankan lebih banyak komponen analit jika dibandingkan dengan kolom C8. Analit akan terelusi lebih lambat di kolom ini.
Apa perbedaan utama antara Kolom C8 dan C18?
Perbedaan utama antara kolom C8 dan C18 adalah kolom C8 memiliki Oktilsilana sebagai fase diam sedangkan kolom C18 memiliki Oktylsilana sebagai fase diam.
Kolom C8 dan C18 berbeda satu sama lain menurut fase diamnya. Kami menggunakan kolom ini dalam HPLC (kromatografi cair kinerja tinggi). Senyawa yang kami gunakan pada kolom ini memiliki panjang rantai alkil yang berbeda dengan senyawa silan.
Perbedaan utama antara kolom C8 dan C18 adalah kolom C18 terdiri dari 18 karbon yang terikat pada silika yang merupakan rantai karbon lebih panjang dari C8. Karena rantai karbon ekstra, C18 memiliki luas permukaan luas yang menawarkan waktu reaksi tambahan antara fase terikat dan senyawa. Akibatnya, senyawa-senyawa terelusi lebih bertahap dari kolom, dan terjadi lebih banyak isolasi.
Apa Perbedaan Antara Kolom C8 dan C18?
Kolom C8 adalah salah satu bentuk kolom yang terdapat pada beberapa peralatan HPLC, dan memiliki Oktilsilana sebagai fase diamnya. Kolom C8 menunjukkan waktu retensi yang rendah. Selain itu, analit terelusi lebih cepat di kolom ini. Hal ini disebabkan karena fasa diamnya kurang padat.
Kolom C18, sebaliknya, juga merupakan bentuk kolom yang kita gunakan pada peralatan HPLC, namun memiliki Octadecylsilane sebagai fase diamnya. Lebih penting lagi, kolom ini menunjukkan waktu retensi yang tinggi. Selain itu, analit terelusi secara perlahan di kolom ini. Hal ini disebabkan oleh kepadatan fase diam yang tinggi.
Infografis berikut menyajikan perbedaan mendetail antara kolom C8 dan C18 sebagai perbandingan berdampingan.
Apalagi C18 lebih padat dari kolom C8. Dan ini meningkatkan panjang jalur analit melalui kolom. Selain itu, hal ini memungkinkan pemisahan senyawa yang lebih kompleks. Waktu retensi kolom ini tinggi. Selain itu, hidrofobisitas fase diamnya tinggi. Hal ini memungkinkan elusi lambat senyawa nonpolar melalui kolom.
Aplikasi kolom jenis ini terutama dalam ilmu lingkungan, industri farmasi, analisis kimia, dll.
Kolom C8 digunakan jika diinginkan RT yang kecil, jika hidrofobisitasnya rendah, waktu retensi untuk analit non-polar lebih sedikit, oleh karena itu, analit atau senyawa non-polar lebih cepat terpisah dengan kolom C8. C8 dipilih daripada C18, dalam matriks fase terbalik dimana derajat hidrofobisitasnya rendah. Namun, kolom C18 lebih diterima dan digunakan secara luas karena silika gel C18 berinteraksi dengan berbagai analit, oleh karena itu kolom ini digunakan. dalam pemisahan, studi kualitatif dan kuantitatif di Industri Farmasi, analisis kimia, dan ilmu lingkungan.
Tabel Perbedaan Kolom C8 vs C18
| Kolom C8 | Kolom C18 | |
| Definisi | Kolom C8 adalah bentuk kolom yang ada di beberapa peralatan HPLC, dan memiliki Octylsilane sebagai fase stasionernya. | Kolom C18 adalah bentuk kolom, kami gunakan pada peralatan HPLC yang memiliki Octadecylsilane sebagai fase diamnya |
| Fase Stasioner | Fase diam kolom C8 berisi Octylsilane | Fase diam kolom C18 berisi OctadecyIsilane. |
| Waktu Penyimpanan | Kolom C8 menunjukkan waktu retensi yang rendah. | Kolom C18 menunjukkan waktu retensi yang tinggi |
| Atom karbon | Jumlah atom karbon pada kolom C8 adalah 8. | Jumlah atom karbon dalam kolom C18 adalah 18. |
| Elusi | Analit lebih cepat terelusi di kolom C8 | Analit terelusi lebih lambat di kolom C18. |
| Kepadatan | Kolom C8 memiliki fase diam yang kurang padat. | Kolom C18 memiliki fase stasioner padat yang tinggi. |
| Hidrofobisitas | Fase diam C8 memiliki hidrofobisitas rendah. | Fase diam C18 memiliki hidrofobisitas tinggi. |
| Pergerakan senyawa nonpolar | Senyawa nonpolar bergerak ke bawah kolom dengan cepat. | Senyawa nonpolar bergerak ke bawah kolom secara perlahan. |
- C18 memiliki 18 atom karbon sedangkan C8 hanya memiliki 8 atom karbon.
- C18 memiliki rantai karbon yang lebih panjang, tetapi C8 memiliki rantai yang lebih pendek.
- C18 memiliki retensi lebih tinggi sedangkan C8 memiliki retensi lebih pendek.
- C18 memiliki hidrofobisitas yang lebih tinggi, tetapi C8 memiliki hidrofobisitas yang lebih rendah.
memiliki
tinggi
Dengan perbandingan kolom HPLC yang tercantum di atas, lebih mudah untuk mengetahui kolom yang tepat yang harus digunakan ketika melakukan berbagai jenis HPLC.
