Berbagai jenis kolom HPLC dari sudut pandang analitis. tahu tentang apa itu kolom HPLC? Kolom adalah jantung dari HPLC. Fase diam kolom memisahkan komponen sampel yang diinginkan menggunakan berbagai parameter fisik dan kimia.
https://uhplcs.com/wp-content/uploads/2023/05/types-of-HPLCColumns.jpg
Jenis Kolom HPLC
Biasanya terbuat dari baja tahan karat untuk menahan tekanan tinggi yang disebabkan oleh pompa untuk memindahkan fase gerak melalui kolom mengambil bahan lain termasuk puncak dan kaca. Partikel kecil di dalam kolom disebut “packing” yang menyebabkan preset high-back pada a laju aliran normal.
Bahan pengemas kolom biasanya silika gel karena bentuk partikelnya, sifat permukaannya, dan struktur porinya memberikan pemisahan yang baik.
Jenis Kolom HPLC
There are various columns that can be used in the HPLC:
- Guard Column
- Derivatizing column
- Capillary column
- Fast Column
- Analytical Column
- Preparatory Column
Guard Column
Kolom Penjaga ditempatkan di anterior kolom pemisah. Ini melindungi dan mendorong kehidupan dan Kegunaan kolom pemisah. pelindung digunakan untuk menyaring atau menghilangkan partikel yang menyumbat kolom pemisah dan menghilangkan senyawa atau ion yang pada akhirnya dapat menyebabkan penurunan penyimpangan garis dasar, resolusi, penurunan sensitivitas, dan menciptakan Puncak palsu.
Kolom ini juga menghilangkan presipitasi senyawa saat bersentuhan dengan halaman stasioner dan seluler. kolom-kolom ini harus dimodifikasi secara rutin untuk mengoptimalkan perlindungannya.
Derivatizing column
Derivatisasi melibatkan reaksi kimia antara analit dan reagen untuk mengubah sifat kimia dan fisik suatu analit. kegunaan utama turunan dalam HPLC adalah meningkatkan deduksi, perubahan matriks untuk pemisahan yang lebih baik, menstabilkan analit sensitif, dan perubahan struktur molekul dan polaritas analit untuk kromatografi yang lebih baik.
Kerugian: prosedurnya menjadi rumit sehingga menjadi sumber kesalahan dalam analisis dan menambah total waktu analisis.
Keuntungan: meskipun memiliki kekurangan, namun mungkin masih diperlukan untuk memecahkan masalah pemisahan atau deteksi tertentu.
Micro column
HPLC mengarah ke kolom yang lebih kecil yang disebut kolom mikro, kolom kapiler yang diameternya kurang dari satu milimeter. Diameter kolom lubang kecil adalah 1 sampai 2 mm. Kolom ini juga memiliki diameter dalam yang sama tetapi panjangnya jauh lebih pendek dibandingkan kebanyakan kolom lainnya. Dengan menggunakan kolom ini Anda dapat meningkatkan sensitivitas, mengurangi waktu analisis, mengurangi penggunaan fase gerak, dan meningkatkan reproduktifitas.
Analytic Column
Ini adalah bagian terpenting dari HPLC yang menentukan efisiensi pemisahan. biasanya panjangnya 5 sampai 25 sentimeter dan diameter bagian dalam 3 sampai 5 mm. Kolom HPLC dipisahkan oleh gaya antarmolekul yang berbeda antara zat terlarut dan fase diam dan gaya antara zat terlarut dan fase gerak.
Prepatory Column
Panjangnya 10 hingga 15 sentimeter dan diameter bagian dalam 4,6 mm. Itu disimpan dengan partikel yang berdiameter 5 mikrometer. itu terdiri dari pengatur tekanan balik dan kolektor. pengatur tekanan unggun ini ditempatkan di posterior detektor HPLC.
