Daftar Isi
Air Untuk Pengujian Mikrobiologi
Air mentah untuk pengujian biasanya menjalani proses klorinasi dengan penambahan natrium hipoklorit (NaOCl) hingga mencapai konsentrasi 2-4 ppm.
Tujuan utama klorinasi ini adalah untuk mengeliminasi mikroba dalam air, sehingga sistem air dapat menghasilkan air murni dengan standar kualitas mikroba yang spesifik.
Akan tetapi ini juga mempunyai dampak pada pengujian mikrobiologi farmasi.
Mari kita bahas mekanisme aksinya:
Pada sampel air, saat natrium hipoklorit larut, menghasilkan asam hipoklorit dan ion hipoklorit. Ion hipoklorit ini, yang dikenal sebagai “klorin bebas”, memiliki peran penting dalam proses klorinasi mikroba dalam air. Ion-ion ini sangat reaktif dan mampu menembus dinding sel melalui lipid, kemudian merusak enzim di dalam sel sehingga mikroba mati.
Namun, tidak semua klorin bebas terpakai dalam proses klorinasi. Klorin yang masih tersisa, yang dikenal sebagai “sisa klorin”, dapat mengganggu analisis mikroba pada air dan berpotensi mengubah hasil analisis.
Untuk menangani hal ini, kita dapat menggunakan natrium tiosulfat (Na2S2O3) untuk menetralkan atau menghilangkan sisa klorin. Natrium tiosulfat bereaksi dan membentuk natrium hidrogen sulfat atau natrium bisulfat, yang merupakan garam tidak aktif.
Reaksi kimianya adalah sebagai berikut:
Na2S2O3 + 4HOCl + H2O —–> 2NaHSO4 + 4HCl
Penghilangan Klorin pada Air
Sebelum sterilisasi, tambahkan 0,1 ml larutan natrium tiosulfat 10% ke dalam botol sampel air.
Larutan ini dapat dibuat dengan melarutkan 100 gram kristal natrium tiosulfat dalam sekitar 500 ml air hingga volume akhir menjadi 1000 ml. Larutan ini dapat disimpan dalam lemari pendingin selama enam bulan.
Dengan menetralkan sisa klorin ini, kita dapat menentukan jumlah mikroba sebenarnya dalam sampel air tanpa mempengaruhi perolehan kembali mikroba.
Pengukuran Natrium Hipoklorit
Untuk mengukur konsentrasi natrium hipoklorit dalam air, Anda dapat menggunakan beberapa metode berikut:
- Metode Titrimetri: Metode ini melibatkan penambahan sampel ke dalam jumlah berlebihan larutan asam kalium iodida (KI) dan kemudian mentitrasi iodin yang dibebaskan (I2) dengan larutan standar natrium tiosulfat atau fenilarsin oksida, menggunakan pati sebagai indikator, sampai warna biru menghilang
- Metode Spektroskopi UV/Vis: Metode ini memungkinkan pengukuran sampel tanpa memerlukan berbagai macam reagen dan hanya dalam waktu 30 detik. Spektrometer UV/Vis seperti PerkinElmer LAMBDA® 365 dapat digunakan untuk pengukuran natrium hipoklorit dalam pengaturan QA/QC di mana akurasi dan kecepatan sangat penting
- Metode Iodometri: Dalam kondisi asam, hipoklorit bereaksi dengan iodida untuk menghasilkan jumlah triiodida (I3-) yang setara. I3- yang dilepaskan dititrasi dengan larutan tiosulfat standar hingga titik akhir yang tidak berwarna. Jumlah digit tiosulfat yang diperlukan sebanding dengan konsentrasi hipoklorit dalam sampel pemutih asli
Harap diingat bahwa setiap metode memiliki kelebihan dan kekurangan tersendiri, dan pilihan metode tergantung pada kebutuhan dan kondisi spesifik Anda. Selalu pastikan untuk mengikuti prosedur keselamatan yang tepat saat melakukan pengukuran ini.
sumber :
