Berapa waktu retensi di HPLC?
Waktu retensi (RT) adalah ukuran waktu yang dibutuhkan zat terlarut untuk melewati kolom kromatografi. Ini dihitung sebagai waktu dari injeksi hingga deteksi. RT untuk suatu senyawa tidak tetap karena banyak faktor yang dapat mempengaruhinya meskipun menggunakan HPLC dan kolom yang sama.
Bagaimana Anda meningkatkan waktu retensi di HPLC?
Analis dapat mengubah retensinya dengan mengubah polaritas fase gerak (fasa gerak bersaing dengan zat terlarut). Jadi fase gerak yang lebih polar akan meningkatkan retensi, dan fase gerak yang lebih non-polar akan menurunkan retensi.
Bagaimana cara mengurangi waktu retensi di HPLC?
Dengan meningkatnya suhu, waktu retensi akan menurun. Jika ruangan mengalami fluktuasi suhu yang luas, waktu retensi HPLC mungkin akan terpengaruh. Solusi terbaik adalah menjalankan analisis pada suhu yang dapat dikontrol dengan menggunakan oven.
Faktor apa saja yang mempengaruhi waktu retensi di HPLC?
Untuk senyawa tertentu, waktu retensi akan bervariasi tergantung pada:
tekanan yang digunakan (karena itu mempengaruhi laju aliran pelarut)
sifat fase diam (tidak hanya bahan pembuatnya, tetapi juga ukuran partikelnya)
Waktu Retensi
- Waktu retensi diubah ke nilai konstan baru
- Waktu retensi yang tidak menentu
- Meningkatkan waktu retensi
- Mengurangi waktu retensi
Waktu retensi diubah ke nilai konstan baru:
Periksa kolom, fase gerak, suhu, metode, laju aliran
Menambah/mengurangi waktu retensi:
- Kolom terkontaminasi, terdegradasi
- Sistem tidak seimbang
- Fase gerak terkontaminasi
Waktu retensi yang tidak menentu:
- Periksa apakah sistem juga mengalami tekanan pompa yang tidak menentu atau fluktuasi tekanan
- Sistem tidak seimbang
- Periksa kebocoran
- Pencampuran pelarut yang tidak tepat
- Fluktuasi suhu
