Pengukuran Tailing
Untuk mengukur pengekoran puncak, ada dua metode utama:
- Faktor pengekoran (Tf): digunakan di industri farmasi. Misalkan a dan b adalah setengah lebar puncak pada 5% tinggi puncak, a adalah setengah lebar depan, b adalah setengah lebar belakang. Tf = \frac{(a + b)}{2a}Tf=2a(a+b)​
- Faktor asimetri (As): digunakan di sebagian besar industri lain. Seperti dalam Tf, a dan b adalah setengah lebar puncak, tetapi pada 10% tinggi puncak. As = \frac{b}{a}As=ab​
Kedua metode pengukuran pengekoran ini bisa digunakan, kecuali jika sudah ditentukan dalam metode atau standar.
Tailing yang diterima
Dalam kromatografi, pengekoran puncak yang dapat diterima biasanya memiliki nilai Faktor Asimetri (As) antara 0.9 hingga 1.2. Nilai 0.9 menunjukkan sedikit pengekoran depan.
Secara praktis, nilai As di bawah 1.5 biasanya dianggap baik untuk bekerja, dan nilai hingga As = 2.0 mungkin dapat diterima tergantung pada pemisahan dan resolusi puncak.
Jika nilai As lebih besar dari 2.0, maka ada masalah yang perlu diidentifikasi dan diperbaiki.
Masalah yang mungkin timbul akibat pengekoran puncak meliputi:
- Puncak dengan nilai As yang besar mungkin memiliki tinggi puncak yang signifikan berkurang. Ini mempengaruhi analisis ketika mendeteksi rentang konsentrasi kimia yang berbeda-beda.
- Sistem analisis data mungkin tidak secara akurat menetapkan akhir dari sebuah puncak, sehingga area puncak dihitung salah.
Untuk menghentikan pengekoran puncak sejak awal, ada banyak penyebab pengekoran puncak yang mungkin dan berbagai solusi yang berbeda. Beberapa langkah yang dapat diambil untuk mengurangi pengekoran puncak meliputi:
- Menggunakan silika kemurnian tinggi untuk mengurangi interaksi dengan grup silanol.
- Menyesuaikan pH fase gerak untuk mengurangi ionisasi grup silanol.
- Menambahkan agen penutup permukaan untuk menghalangi interaksi dengan grup silanol.
- Menggunakan kolom yang dirancang khusus untuk senyawa basa untuk mengurangi pengekoran.
Penting untuk mengidentifikasi penyebab spesifik dari pengekoran puncak dalam sistem Anda dan memilih solusi yang paling sesuai untuk mengatasinya. Dengan demikian, Anda dapat memastikan hasil analisis yang lebih akurat dan dapat diandalkan.
Hentikan Tailing di Awal
Ada banyak kemungkinan penyebab peak tailing dan berbagai perbaikannya.
| Kemungkinan Penyebab | Pencegahan/Solusi |
| Tailing Puncak | |
| Interaksi dengan silanol aktif | 1. Gunakan fase stasioner berbasis silika kemurnian ultra-tinggi 2. Tambahkan aditif fase seluler dasar (mis. TEA) – tidak diperlukan dengan fase kemurnian ultra-tinggi |
| Chelation dengan ion logam dalam fase diam | Seperti di atas |
| PH fase gerak salah | 1. Menurunkan pH fase gerak untuk menekan ionisasi silanol 2. Meningkatkan konsentrasi buffer |
| Frit yang diblokir | 1. Balikkan rata kolom 2. Menggunakan filter in-line |
| Kolom kosong | 1. Balikkan rata kolom 2. Mengganti kolom |
| Volume mati yang tidak tersapu | 1. Minimalkan jumlah koneksi 2. Gunakan tabung koneksi yang lebih pendek 3. Periksa semua fitting ketat |
