Perbedaan HPLC dan uHPLC: Apa yang Harus Anda Ketahui?

HPLC

HPLC (high performance liquid chromatography) dan UHPLC (ultra-high performance liquid chromatography) adalah dua teknik analisis yang sering digunakan dalam pemisahan molekul. Kedua teknik ini memiliki prinsip kerja yang sama, yaitu menggunakan kolom yang berisi fase diam dan fase gerak untuk memisahkan, mengidentifikasi, dan mengukur konsentrasi berbagai senyawa dalam sampel.

uhplc

Namun, ada beberapa perbedaan mendasar antara HPLC dan UHPLC yang perlu Anda ketahui sebelum memilih salah satu teknik ini untuk aplikasi Anda. Perbedaan-perbedaan ini berkaitan dengan ukuran partikel, dimensi kolom, laju alir, tekanan balik, dan parameter deteksi.

Perbedaan HPLC vs UHPLC

Berikut adalah tabel yang membandingkan HPLC dan UHPLC berdasarkan aspek-aspek tersebut:

AspekHPLCUHPLC
Ukuran Partikel3-5 µm2 µm atau lebih kecil
Dimensi Kolom4,6 mm x 250 mm2,1 mm atau kurang x 100 mm
Laju Alir1-2 mL/menit0,2-0,7 mL/menit
Tekanan Balik400-600 bar1500 bar atau lebih
Parameter Deteksi250 Hz atau kurang250 Hz atau lebih

Dari tabel di atas, Anda dapat melihat bahwa UHPLC menggunakan partikel dan kolom yang lebih kecil, laju alir yang lebih rendah, dan tekanan balik yang lebih tinggi daripada HPLC. Hal ini memungkinkan UHPLC untuk memberikan resolusi, kecepatan, dan sensitivitas yang lebih tinggi daripada HPLC. Dengan kata lain, UHPLC dapat memisahkan lebih banyak puncak dalam waktu yang lebih singkat dan dengan kuantitas sampel yang lebih sedikit.

Namun, UHPLC juga memiliki beberapa kelemahan dibandingkan HPLC. Pertama, UHPLC membutuhkan sistem yang lebih kuat dan tahan tekanan tinggi, yang berarti biaya investasi dan operasional yang lebih tinggi. Kedua, UHPLC membutuhkan pelarut dan sampel yang lebih murni, yang berarti proses persiapan yang lebih rumit dan mahal. Ketiga, UHPLC membutuhkan detektor yang lebih responsif dan akurat, yang berarti kualitas data yang lebih baik tetapi juga lebih rentan terhadap gangguan.

Oleh karena itu, Anda tidak dapat sembarangan memilih antara HPLC dan UHPLC tanpa mempertimbangkan tujuan dan kebutuhan analisis Anda. Anda harus menentukan faktor-faktor seperti kompleksitas sampel, analit yang harus diukur, throughput yang diinginkan, sensitivitas yang dibutuhkan, dan anggaran yang tersedia. Anda juga harus mempertimbangkan kemudahan transfer metode, validasi, dan standarisasi antara HPLC dan UHPLC.

Secara umum, HPLC lebih cocok untuk analisis rutin yang tidak membutuhkan resolusi dan kecepatan yang tinggi, tetapi lebih mengutamakan ekonomi dan keandalan. UHPLC lebih cocok untuk penelitian dan pengembangan metode yang membutuhkan resolusi dan kecepatan yang tinggi, tetapi juga membutuhkan kualitas dan presisi yang tinggi.


Sumber:

1 HPLC vs UHPLC: Pilih yang Mana? – Wiralab

2 HPLC vs UHPLC – Learn the difference | HPLC vs UPLC – Shimadzu

3 Analisis Perbandingan HPLC dan Teknik Lain untuk Deteksi Antibiotik

4 Apa Perbedaan Antara HPLC dan UPLC? – strephonsays

5 Perbedaan Antara HPLC dan UPLC (Sains & Alam)

M. Fithrul Mubarok
M. Fithrul Mubarokhttps://farmasiindustri.com
M. Fithrul Mubarok, M.Farm.,Apt adalah Blogger Professional Farmasi Industri pertama di Indonesia, pendiri dan pengarang dari FARMASIINDUSTRI.COM sebuah blog farmasi industri satu-satunya di Indonesia. Anda dapat berlangganan (subscribe) dan menfollow blog ini untuk mendapatkan artikel terkait farmasi industri. Email: [email protected] WhatsApp/WA: 0856 4341 6332

Related Articles

LEAVE A REPLY

Please enter your comment!
Please enter your name here

This site uses Akismet to reduce spam. Learn how your comment data is processed.

spot_imgspot_imgspot_imgspot_img

Berlangganan Artikel

Berlangganan untuk mendapatkan artikel terbaru industri farmasi

Stay Connected

51FansLike
0FollowersFollow
0SubscribersSubscribe
-

Artikel terkini